綜合安全等級評價方法（試行）
發布時間：2010-01-14 共2頁
3、細菌檢測包括對弧菌數量的測定及其優勢菌種類的鑒定，以下為弧菌總數標準化檢測程序及評分標準：
（1）弧菌總數標準化檢測程序
①樣本處理：
將初樣（混合樣）放入初樣管中，用無菌扦樣器搗碎樣本制成實驗樣本。
②母液及稀釋液的制備：
用扦樣器扦取0.5g（0.5ml）實驗樣本于母液管（內含4.5ml Nacl溶液）中，制成母液，并振蕩混勻，此時母液管濃度級別為10-1。
用微量移液器吸取母液管中的液體0.5ml，注入A管（內含4.5ml Nacl溶液）配成濃度級別為10-2的稀釋液，并振蕩混勻。
以此類推，制成B管10-3稀釋液和C管10-4的稀釋液。
③細菌接種及培養：
用無菌微量移液器分別吸取ABC管中的稀釋液，向特定選擇性培養基TCBS上滴1滴溶液（0.05ml），并做平行對照組，微微搖晃使液體盡量散開，待液體完全被培養及吸收后，放于25-28℃倒置培養36-48小時后取出計數。
④細菌總數計數及計算均值
無論細菌菌落大小均要求計數，經計算得每個濃度的計數平均值分別用ABC來表示。
⑤結果判定原則：
a、首先選擇平均菌落在20~200之間的數值作為檢測結果，如果只有一項數值介于20~200之間，則選擇該數值為最終結果，即若A屬于[20，200]，BC不屬于[20，200]，則A為最終結果；
b、如果有兩項數值介于20~200之間，則按以下原則：
AB屬于[20~200]，C小于20，則選B為最終結果；
BC屬于[20，200]，A大于200，則選C為最終結果。
c、如果ABC均大于200，則選C為最終結果，如果ABC均小于20，則選A為最終結果。
d、可以接受的結果：
如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此兩種結果可由多種原因導致，需比較實驗組和對照平行組來判定是否屬于上述幾種情況，如果認為結果不能更改，則可選擇B為最終結果，B為可接受結果。
e、如果除了上述的這些情況外，還出現了其它的結果，則說明實驗過程中存在嚴重的錯誤，應當重新實驗。
（2）評分標準：
①弧菌總數計數的最終結果若選擇A為最終檢測結果的記為1；
②弧菌總數計數的最終結果若選擇B為最終檢測結果的記為2；
③弧菌總數計數的最終結果若選擇C為最終檢測結果的記為4；
三、安全等級的劃分
安全等級分成五個等級，具體如下：
綜合安全等級評分表
|
安全等級 |
安全 |
比較安全 |
一般安全 |
比較危險 |
危險 |
|
綜合評分 |
3、4 |
5、6 |
7、8 |
9、10 |
12 |
1、等級提升原理及概念：
由于不同致病性細菌或寄生蟲對不同生物體造成的危害程度不同，所以每類生物體都有其專屬的致病性細菌或寄生蟲病，為了更好地體現這種差異性，也為了更準確地出具綜合安全等級評價結果，于是引入等級提升的概念：在細菌檢測或寄生蟲檢測中，如果處于優勢生長的細菌或寄生蟲，恰好為該品種主要細菌病或寄生蟲病中的致病性細菌或寄生蟲，則需進行等級提升。
2、等級提升原則：
①范圍及條件：當細菌檢測和寄生蟲檢測中的最終判定結果最高級，即評分為4的時候，并且所鑒定的優勢菌（種）種類為該樣本所列的致病性病源菌（種），則需進行等級提升；
②系統等級提升：在系統綜合評分后，將系統的綜合安全等級向危險等級方向提升一個等級，即如果系統綜合評分為7，系統綜合安全等級為一般安全等級，則經過提升后，系統綜合安全等級為比較危險等級。
